Pipete su laboratorijska oprema koja se koristi za mjerenje i prijenos vrlo malih količina tekućina. Točnost mjerenja pipetom je vrlo važna jer razlike u zapremini ispuštene pipetom mogu utjecati na eksperimentalne rezultate. Da biste osigurali točnost, važno je provjeravati kalibraciju pipete svakih nekoliko mjeseci. Postupak kalibracije je koristan za provjeru da li iz ove opreme kaplje tečnost u odgovarajućoj zapremini, tako da se po potrebi mogu izvršiti popravke.
Korak
Dio 1 od 2: Provjera kalibracije
Korak 1. Prikupite potrebne materijale
Za provjeru kalibracije pipete potrebne su pipeta, vrhovi pipeta, destilirana voda, čaša, termometar, vaga i čaša za vaganje. Vaga koja se koristi mora biti u skali od mikrograma za kalibriranje mikropipete s maksimalnom vrijednošću od 1 L.
- Neće vam trebati više od 5 ml vode. Napunite posudu vodom.
- Uvjerite se da je vrh pipete ispravan i da se čvrsto uklapa u pipetu.
Korak 2. Izmjerite temperaturu destilirane vode
Stavite termometar u vodu i ostavite ga da odstoji najmanje minut. Ako se crvena linija termometra i dalje pomiče, pričekajte još minutu. Nakon jedne minute zabilježite temperaturu. Uzmite termometar i osušite ga kad završite.
Temperaturu vode važno je znati jer će se koristiti za proračune za provjeru kalibracije
Korak 3. Postavite šalicu za vaganje na vagu i izravnajte vagu
U idealnom slučaju, korištena vaga ima vrata i izolirani prostor unutra. Stavite posudu za vaganje u komoru za vaganje i zatvorite vrata. Ako vaša vaga nema kabinu i vrata, samo stavite šalicu za vaganje na vagu. Pritisnite dugme „Nula“ili „Tara“i sačekajte da vaga pokaže nulu.
Nultiranje vage smanjuje težinu plastične čaše i omogućuje vam vaganje samo težine tvari koja se nalazi u čaši
Korak 4. Pripremite pipetu za kalibraciju
Obrišite pipetu etanolom prije pokretanja i provjerite da ništa ne začepljuje vrh pipete. Pričvrstite odgovarajući vrh pipete na vrh pipete i odredite zapreminu koju ćete testirati.
Za kalibraciju testirajte najmanje i najveće zapremine koje se mogu ukloniti iz pipete
Korak 5. Operite vrh pipete prije kalibriranja
Pritisnite dugme do prve granice i umočite vrh pipete u destilovanu vodu na dubinu od približno 2 mm. Otpustite dugme da upije dio tečnosti, a zatim ponovo otpustite tečnost pritiskom na dugme. Ponovite ovaj korak tri puta za ispiranje vrhova kapaljke prije upotrebe.
Pritisnite dugme do drugog ograničenja da uklonite preostalu tečnost na vrhu pipete, a zatim izvadite pipetu iz vode
Korak 6. Usisajte kalibracijski volumen
Dok je vrh pipete postavljen izvan destilirane vode, pritisnite dugme do prve granice. Uronite vrh pipete 2 mm duboko u destiliranu vodu i otpustite dugme za usisavanje tekućine u vrh pipete. Sačekajte oko 1 sekundu pre nego što izvadite vrh kapaljke iz vode.
Uverite se da je vrh pipete potpuno potopljen tokom procesa usisavanja. Na vrhu kapaljke ne bi trebalo biti mjehurića ili bi rezultat mogao biti pogrešan
Korak 7. Sipajte tečnost u posudu za vaganje na vagi
Postavite vrh pipete na dno čaše za vaganje, a zatim pritisnite dugme pipete do prve granice. Premjestite se na drugu točku, malo dalje od vode, a zatim pritisnite dugme do druge granice. Držeći dugme pritisnuto, podignite vrh pipete iz čaše za vaganje.
Držite vrh pričvršćen za pipetu jer ćete ga ponovo koristiti za neka druga kalibracijska ispitivanja
Korak 8. Zapišite težinu prikazanu na vagi
Zatvorite vrata kabine za balansiranje ako koristite vagu. Pričekajte dok se brojevi više ne promijene. Zapišite u svoju bilježnicu.
Važno je pričekati da se brojevi na ljestvici ponovo promijene prije nego ih zapišete. Bilješke će krenuti naopako ako ne čekate
Korak 9. Ponovite ovaj postupak za čitanje najmanje 10 puta
Ponovno nulirajte vagu, operite vrhove pipeta prije upotrebe, isisajte istu količinu tekućine, uklonite volumen, a zatim zabilježite težinu. Zabilježite težinu destilirane vode za istu zapreminu, a zatim procijenite sve bilješke.
Ovaj postupak možete ponoviti za različite sveske ako se svaki volumen testira više puta
Dio 2 od 2: Izračunavanje rezultata kalibracije
Korak 1. Definirajte formulu za izračunati volumen
Formula za izračunavanje zapremine tekućine koju izbacuje pipeta je V = w * Z, w je težina vode, Z je faktor pretvorbe na temelju gustoće vode, dok je V volumen količine vode uklonjen.
- Varijabla Z može se dobiti izračunavanjem gustoće vode pomoću temperature zabilježene na početku eksperimenta.
- Na primjer: Ako je temperatura vode 23 ° C, vrijednost Z je 1,0035 g/mg.
Korak 2. Izračunajte ukupni prosjek kalibracija pipete
Količina vode koju ispušta pipeta izmjerena je najmanje deset puta. Da biste procijenili sve ove vrijednosti, zbrojite ih sve i podijelite s 10. Ako ste izvršili više ili manje procesa, zbrojite ukupne rezultate, a zatim ih podijelite s brojem provedenih ispitivanja.
- Na primjer: Težina vode iz 10 eksperimenata koje ste izveli s pipetom od 10 μL je sljedeća: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 i 9, 98.
- Prosječna vrijednost je: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84 /10 = 9.984
Korak 3. Uključite varijable u jednadžbu i riješite
Nakon što odredite ispravan broj za svaku varijablu, uključite je u formulu i dovršite izračunati volumen. Da biste riješili ovu jednadžbu, jednostavno pomnožite prosječnu težinu svih ispitivanja s vrijednošću Z.
Na primjer: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10, 019
Korak 4. Izračunajte točnost pipete
Koristite jednadžbu A = 100 x Vavg/V0 za izračunavanje tačnosti pipete. A označava tačnost pipete, Vavg je izračunati srednji volumen, i V0 je vrijednost postavljena na pipeti. Vrijednost točnosti treba biti između 99-101%.
- Ako je pipeta pravilno kalibrirana, izračunata vrijednost trebala bi biti vrlo blizu stvarne vrijednosti postavljene na pipeti.
- Na primjer: A = 100 x Vavg/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = 100.19%
- Ova pipeta je pravilno kalibrirana.
Korak 5. Ako je potrebno, pošaljite pipetu na kalibraciju
Ako vaša pipeta ne prođe kalibracijski test, nemojte je koristiti sada za eksperimentiranje. Pipete su vrlo krhka i skupa laboratorijska oprema. Ne možete sami popraviti kalibraciju, pipeta se mora poslati na popravak. Alternativno, nekoliko kompanija će doći u vašu laboratoriju i kalibrirati pipetu na licu mjesta.
